DOI: 10.36871/vet.san.hyg.ecol.202004012
УДК 619:579:578.81
Авторы
1Глазунов Е.А., канд. биол. наук, специалист отдела развития
2Зурабов Ф.М., аспирант
3Павлова И.Б., д-р биол. наук, главный научный сотрудник, профессор
3Толмачева Г.С., научный сотрудник
1НПЦ «Микромир». Москва 107031, Российская Федерации
2МГУ имени М.В. Ломоносова, Биологический факультет, кафедра вирусологии. Москва 119234, Российская Федерация.
3ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии – филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН. Москва 123022, Российская Федерация
Аннотация
Одной из актуальных проблем современности является растущий уровень резистентности к антибиотикам среди бактерий – патогенов человека и животных. В этой связи все большее внимание уделяется альтернативным терапевтическим агентам. В настоящей работе исследовано воздействие бактериофага vB_KpnP_FZ12 на биопленки Klebsiella pneumoniae.
Использовали штамм Klebsiella pneumoniae 315 и бактериофаг vB_KpnP_FZ12.
Для изучения формирования биопленок в жидких питательных средах популяциями Klebsiella pneumoniae 315 использовали 17…18-часовые культуры микроорганизмов в S-форме (третья генерация). Взвесь бактерий в концентрации 1∙105 КОЕ/мл в объеме 5 мл перемешивали на аппарате Vortex и вносили в чашки Петри с 20 мл BHI бульона. Стерильные предметные стекла помещали на дно чашки Петри, сверху располагали стерильные обезжиренные покровные стекла, инкубировали в термостате в течение 24…48 ч при температуре 37°С. Через 24 ч добавляли 0,1 мл бактериофага vB_KpnP_FZ12 концентрацией 1∙106 БОЕ/мл, инкубировали в термостате в течение 24 ч при температуре 37°С. Параллельно инкубировали контрольные стекла без добавления фага.
Для сохранения естественной архитектоники образцы прижизненно фиксировали парами 25%-го глутарового альдегида в течение 3…5 ч.
Было показано, что бактериофаг способен эффективно разрушать структуру биопленки, кластеров, при этом значительно сокращая количество бактерий.
Ключевые слова
бактериофаги, фаги, биопленки, Klebsiella pneumoniae, антибиотикорезистентность
