УДК 636.5.087.69
doi: 10.36871/vet.san.hyg.ecol.202201009
Авторы
Екатерина Михайловна Ленченко,
Дмитрий Алексеевич Блюменкранц,
Владислав Владимирович Пономарев,
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств», Москва, Российская Федерация
Инна Борисовна Павлова,
Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной санитарии, гигиены и экологии — филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН, Москва, Российская Федерация
Галина Сергеевна Толмачева,
ФГБНУ «Федеральный научный центр пищевых систем им. В.М. Горбатова», Москва, Российская Федерация
Аннотация
В статье представлены общие закономерности формирования трехмерной многослойной гетерогенной структуры биопленок in vitro, ex vivo, in vivo. Установлено, что массовая доля клеток биопленок составила 86,8…91,4%, межклеточного матрикса – 8,9…13,2%, что обусловлено строением клеточной стенки микроорганизмов, синтезирующей межклеточный матрикс. Преимущества просвечивающей и сканирующей электронной микроскопии – визуализация L-форм и количественная оценка диаметра, периметра, высоты, площади, объема и химического состава клеток и межклеточного матрикса микроорганизмов. Лазерная модуляционная интерференционная микроскопия позволила исследовать биопленки в режиме реального времени без фиксации и окрашивания микроорганизмов; фазово-контрастная микроскопия – внутрипопуляционные и межпопуляционные взаимодействия в зависимости от изменения pH среды, содержания кислорода и других химических и физических факторов. Люминесцентная микроскопия – перспективный способ для детекции некультивируемых жизнеспособных клеток микроорганизмов. Применение модифицированной окраски по Граму, использование раствора Crocus sativus позволило дифференцировать грамотрицательные и грамположительные микроорганизмы и оценить степень репарации ткани. Разработанный новый методологический подход позволил научно обосновать и экспериментально подтвердить эффективность применения питательных сред, содержащих компоненты для репарации клеточной стенки микроорганизмов.
Ключевые слова
биопленки, патогенные микроорганизмы, L-формы, фагоцитоз, индикация, просвечивающая электронная микроскопия, сканирующая электронная микроскопия, фазово-контрастная микроскопия, лазерная модуляционная интерференционная микроскопия, люминесцентная микроскопия