УДК 619:616.98.578:636.4:575.113:616-085.37
DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202504208
Авторы
Алсу Рузалевна Ахунова,
Гузалия Салиджановна Арутюнян,
Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, Казань, Россия
Антонина Глебовна Галеева,
Наиль Ильдарович Хаммадов,
Марина Анатольевна Ефимова,
Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, Казань, Россия; Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н. Э. Баумана, Казань, Россия
Аннотация
Цирковирус свиней 2-го типа (ЦВС-2) является одним из наиболее значимых патогенов в мировом свиноводстве. В связи с тем, что отличительной чертой цирковирус-ассоциированных болезней свиней (ЦВАБС) является хроническое течение, для определения кинетики вируса в популяциях свиней необходимо внедрение эффективных методов серодиагностики. Целью исследования явилась разработка непрямого иммуноферментного анализа (ИФА) на основе рекомбинантного капсидного белка для определения антител к ЦВС-2. На первом этапе был проведен анализ структуры капсидного белка, на основании которого были определены доминирующие области для распознавания антител. Данные фрагменты были включены в состав мультиэпитопной вставки, кодирующей целевой диагностический антиген молекулярной массой 17,8 кДа. В результате экспрессии фрагмента гена ORF-2 в клетках E. coli был получен растворимый белок, который подвергался очистке до электрофоретически гомогенного состояния посредством металл-хелатной хроматографии. С применением данного антигена с учетом рекомендаций Всемирной организации здравоохранения животных (ВОЗЖ) были оптимизированы условия постановки ИФА. Предварительную оценку аналитических характеристик проводили на выборке заведомо положительных и отрицательных сывороток крови свиней, а также 181 сыворотки откормочного молодняка в возрасте от 3 до 9 мес., отобранных в свиноводческих хозяйствах Республики Татарстан. Было установлено, что средняя серопревалентность ЦВС-2 в отдельных популяциях свиней составляет 72,9 % (95 % ДИ: 66,0–78,9 %). Однако для определения динамики развития ЦВАБС в популяциях свиней необходимо проведение дальнейшего серологического мониторинга в совокупности с оценкой вирусологического профиля поголовья.
Ключевые слова
цирковирус свиней 2-го типа, иммуноферментный анализ, рекомбинантный антиген, прокариотическая экспрессия, серологический мониторинг