УДК 619:636.2:611.013.31
DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202508113

Авторы

Валерия Андреевна Макутина,
Анна Сергеевна Кривоногова,
Альбина Геннадьевна Исаева,
Ирина Михайловна Донник,
Уральский Федеральный аграрный научно-исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (ФГБНУ УрФАНИЦ УрО РАН), Екатеринбург, Россия

Аннотация

Криоконсервация ооцитов и эмбрионов стала неотъемлемой частью вспомогательной репродукции как у людей, так и у животных. Однако методы, используемые для криоконсервации ооцитов крупного рогатого скота, по-прежнему имеют существенные недостатки. Мы использовали модифицированные протоколы витрификации оплодотворенных яйцеклеток КРС и оттаивания бластоцист КРС после витрификации. Цель исследования – определить уровень выживаемости ооцитов, компетентность их к дальнейшему развитию до стадии бластоцисты, а также оценить жизнеспособность полученных эмбрионов и их способность к имплантации после сочетания модифицированных ультрабыстрых методов: витрификации на стадии оплодотворенного ооцита и повторной витрификации/быстрого оттаивания бластоцисты при эмбриотрансфере. Результаты: общие показатели выживаемости ооцитов КРС были сопоставимы при ультрабыстром и стандартном протоколе витрификации: 90,6–86,8 % соответственно. Ооциты MII, полученные из незрелых клеток post mortem, оказались способны к активированному развитию и начинали дробление с получением бластоцист. Статистически достоверных отличий между группами, витрифицированными по стандартному и оптимизированному протоколу, выявлено не было. Полученные эмбрионы на стадии бластоцисты были витрифицированы. Протокол модифицированного оттаивания (регидратации) витрифицированных бластоцист впервые был использован для переноса эмбрионов крупного рогатого скота (КРС) в матку коровы-реципиента. При переносе трех витрифицированных бластоцист, размороженных по модифицированному быстрому протоколу, получена одна беременность. Методы ультрабыстрой витрификации ооцитов и быстрого оттаивания витрифицированных эмбрионов обеспечивают высокую выживаемость и позволяют сократить время витрификации и оттаивания эмбрионов, а значит, и время нахождения эмбрионов вне инкубатора при субоптимальной температуре и осмолярности.

Ключевые слова

витрификация, крупный рогатый скот, криоконсервация бластоцист, криоконсервация ооцитов, экстракорпоральное оплодотворение