УДК 619:616.98:578.831.11
DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202602111

Авторы

Ольга Александровна Минькова,
Елена Игоревна Ярыгина,
Лилия Магометовна Чомаева,
Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии – МВА имени К. И. Скрябина, Москва, Россия

Аннотация

Данное исследование является важным доклиническим этапом изучения влияния хитозана на иммунный ответ у кур против болезни Ньюкасла. Цель исследования – обосновать последующее применение хитозана совместно с вакциной для усиления специфического иммунного ответа у кур против болезни Ньюкасла.
В лабораторном эксперименте изучали влияние 1%-го раствора хитозана на биологические свойства и структуру возбудителя болезни Ньюкасла. Анализ проводили по трем параметрам: 1) гемагглютинирующая активность вируса (количественная реакция гемагглютинации); 2) инфекционная активность вируса (определение 50 % эмбриональной инфекционной дозы (ЭИД₅₀) на СПФ-эмбрионах кур); 3) структурная целостность вирионов (метод просвечивающей электронной микроскопии с негативным контрастированием). Статистическую обработку данных проводили с использованием t-критерия Стьюдента.
Установлено, что классическая реакция гемагглютинации неприменима для прямого анализа из-за катионной природы хитозана и его способности вызывать неспецифическую агглютинацию эритроцитов. Основным результатом явилось сохранение инфекционных свойств вируса после инкубации с хитозаном. Значения титров ЭИД₅₀ в контрольной (вирус + физиологический раствор) и опытной (вирус + раствор хитозана) группах статистически не различались (6,5±0,2 и 6,4±0,3 lg ЭИД₅₀/мл соответственно; p>0,05). Данные электронной микроскопии подтвердили отсутствие деструктивного воздействия полимера на вирусные частицы. Морфология вирионов (плеоморфные частицы с сохранной оболочкой и поверхностными шипами) оставалась неизменной, образование патологических агрегатов не наблюдалось.
Низкомолекулярный хитозан в концентрации 1 % не оказывает вирулицидного действия и не нарушает структурную целостность вакцинного штамма вируса болезни Ньюкасла «Ла-Сота» in vitro. Совокупность данных о сохранении инфекционных и структурных свойств вирусных частиц после инкубации с хитозаном свидетельствует о совместимости данного полимера с антигеном. Полученные результаты являются основой для дальнейших исследований по разработке хитозан-содержащей адъювантной композиции для живой вакцины против болезни Ньюкасла.

Ключевые слова

болезнь Ньюкасла, вирус болезни Ньюкасла, хитозан, in vitro, инфекционная активность, электронная микроскопия, вакцина

Список литературы

  1. Авситидийский Е. А., Борисов В. В., Норкина С. Н. и др. Ньюкаслская болезнь. Обзор ситуации в РФ. Стратегия профилактики // Птицеводство. 2024. № 9. С. 63–70. DOI: 10.33845/0033-3239-2024-73-9-63-70.
  2. Джавадов Э. Д., Хлып Д. Н., Сажаев И. М., Степанова С. В. Болезнь Ньюкасла: патогенез, диагностика и профилактика // БИО. 2021. № 5 (248). С. 22–30. EDN DTAOSR.
  3. Забережный А. Д., Алипер Т. И., Сазанова Э. Я. и др. Парамиксовирусы. Болезнь Ньюкасла. М.: ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности, 2022. 277 с. EDN ZOPQWL.
  4. Колодина К. С. Пчельников А. В., Литенкова И. Ю. Клиническая эффективность вакцины против болезни Ауески свиней // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2025. Т. 2. № 11. С. 110–117. DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202511213. EDN JRFSEP.
  5. Кочиш И. И., Рязанов И. Г., Мясникова О. В. и др. Болезни птиц: Методические указания для лабораторно-практических занятий студентов факультета ветеринарной медицины по специальности «Ветеринария» очного и очно-заочного (вечернего), заочного обучения. М.: ФГБОУ ВО МГАВМиБ – МВА имени К. И. Скрябина, 2024. 69 с. EDN HXGOAI.
  6. Мурадян Ж. Ю., Рогов Р. В., Пименов Н. В. Адьювантная активность хитозана при конструировании вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2021. № 6. С. 29–33. DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202106005.
  7. Полищук С. В., Белявцева Е. А. Контроль за специфической профилактикой при ньюкаслской болезни // Известия сельскохозяйственной науки Тавриды. 2018. № 13 (176). С. 137–145.
  8. Роенко А. Д., Пименов Н. В. Биотехнология противорожистых вакцин: перспективные решения // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2025. № 6. С. 144– 152. DOI: 10.36871/vet.zoo.bio.202506115.
  9. Садовая Е. А., Литвинов О. Б. Особенности разработки и применения ДНК-вакцин в ветеринарной практике // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2024. Т. 2. № 12. С. 126–140. DOI: 10.36871/vet. zoo.bio.202412213.
  10. Садовая Е. А., Пименов Н. В., Литвинов О. Б. Хитинолитические ферменты микроорганизмов и пути их применения в биотехнологии // Ветеринария, зоотехния и биотехнология. 2025. № 4. Т. 2. С. 137–148.
  11. Хронология по болезни Ньюкасла // Официальный сайт Россельхознадзора. URL: https://fsvps.gov.ru/jepizooticheskaja-situacija/rossija/informacija-po-bolezni-njukasla-v-rossijskoj-federacii/hronologija-po-bolezni-njukasla/?ysclid=mksssyykdf715499409.
  12. Chitosan: as highly potential biopolymer obtainable in several advance drug delivery systems including biomedical applications // European Chemical Bulletin. 2023. Vol. 12. SI10. DOI: 10.48047/ECB/2023.12. SI10.0036. 12.
  13. Choi B., Jo D. H., Anower A. K. et al. Chitosan as an Immunomodulating Adjuvant on T-Cells and Antigen-Presenting Cells in Herpes Simplex Virus Type 1 Infection // Mediators of Inflammation, 2016. Vol. 2016. P. 4374375. DOI: 10.1155/2016/4374375.
  14. Gardin Y., Palya V. The positive adjuvant effect of chitosan on antigen-specific cell-mediated immunity after chickens vaccination with live Newcastle disease vaccine // Veterinary Immunology and Immunopathology. 2010. Vol. 136. Issue 3–4. Pр. 351–357. DOI: 10.1016/j.vetimm.2009.10.028.
  15. Kousar K., Naseer F., Abduh M. S. et al. CD44 targeted delivery of oncolytic Newcastle disease virus encapsulated in thiolated chitosan for sustained release in cervical cancer: a targeted immunotherapy approach // Frontiers in Immunology. 2023. Vol. 14. 1175535 р. DOI: 10.3389/fimmu.2023.1175535.
  16. Lampe A. T., Farris E. J., Brown D. M. et al. High- and low-molecular-weight chitosan act as adjuvants during single-dose influenza A virus protein vaccination through distinct mechanisms // Biotechnology and Bioengineering. 2021. Vol. 118. No. 3. Pр. 1224–1243. DOI: 10.1002/bit.27647.
  17. Li Y., Zhao C., Zhuang Z. et al. Effect of chitooligosaccharide on the binding domain of the SARS-COV-2 receptor // International Journal of Biological Macromolecules. 2024. Vol. 278. Pt 4. 134957 р. DOI: 10.1016/j. ijbiomac.2024.134957.
  18. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals: Mammals, Birds and Bees URL: https://www.woah.org/fileadmin/Home/eng/Health_standards/tahm/A_summry.htm.
  19. Nagorskaia V. P., Reunov A. V., Lapshina L. A. et al. Electron microscopic study of the chitosan effect on the intracellular accumulation and the state of tobacco mosaic virus particles in tobacco leaves // Tsitologiia. 2011. Vol. 53. No. 2. Pр. 185–191.
  20. Rahman D. A. Chitin and Chitosan: Prospective Biomedical Applications in Drug Delivery, Cancer Treatment, and Wound Healing // Marine Drugs. 2022. Vol. 20. No. 7. DOI: 10.3390/MD20070460.
  21. Santos-Carballal B., Fernández Fernández E., Goycoolea F. M. Chitosan in Non-Viral Gene Delivery: Role of Structure, Characterization Methods, and Insights in Cancer and Rare Diseases Therapies // Polymers, 2018. Vol. 10. No. 4. Р. 444. DOI: 10.3390/polym10040444.
  22. Wang X., Zhang W., Liu F. et al. ZIntranasal immunization with live attenuated influenza vaccine plus chitosan as an adjuvant protects mice against homologous and heterologous virus challenge // Archives of Virology. 2012. Vol. 157. No. 8. Pр. 1451–1461. DOI: 10.1007/s00705-012-1318-7.